细胞工程是以离体细胞和组织的无菌操作为基础的实验性学科，它需要在模拟动、植物细胞生长发育而设置的实验条件和环境下进行一系列操作。为此需要各种实验设施、设备、适宜的培养条件与技术。今天为大家介绍细胞工程实验室的组成设置，以及所配置的常用仪器设备。

细胞工程实验室的组成设置

细胞工程实验室主要由洗涤室、灭菌室、配制室、无菌操作室(接种室)、培养室、鉴定室等组成。

1.洗涤室

用途：洗涤室主要用于玻璃器皿、用具和培养材料清洗。

配置：洗涤水槽、落水架、干燥箱、柜子、超声波清洗器等。

2.灭菌室

用途：用于培养基及培养器械的灭菌。

配置：配备实验台、高压灭菌锅、排风灭火设备、细菌过滤设备、干热消毒柜、电炉等。

要求：设备的安装和排列要合理，房间要宽敞明亮，通风条件好，地面要便于清洁、防滑。

3.配制室

用途：配制室主要用于配置培养基。

配置：冰箱、天平、微波炉、pH计、培养基分装器、药品柜、器械柜、抽气泵、电炉、各种规格的培养瓶和用具、培养皿、移液管、烧杯、量筒、容量瓶、储藏瓶等。

 

4.无菌操作室(接种室)

用途：主要用于实验材料的接种操作。设置缓冲准备区(更换衣帽、拖鞋、洗手等)和接种区（培养材料的无菌操作）。

配置：超净工作台或接种箱、固定式载物台、移动式载物台、广口瓶、酒精灯、纱布、器械支架、手术剪、解剖刀、解剖针、镊子等。

要求：无菌操作室在工作方便的前提下，宜小不宜大，宜精细密闭，忌粗陋放散，是细胞组织培养研究或生产工作中最关键的部分，关系到培养物的污染率，接种工作效率等重要指标。

5.培养室

用途：能控制光照和温度，保持相对无菌的状态，防止微生物感染，对离体材料进行控制培养。

要求：应保持干燥和清洁。

配置：培养架、转床、摇床、光照培养箱、人工气候箱、生化培养箱、自动控时器、 摇床等。

6.鉴定室

用途：对培养材料进行细胞学鉴定和研究。由制片区和显微观察区组成。

要求：清洁、明亮、干燥，使各种光学仪器不受潮湿和灰尘污染

配置：各种光学仪器

7.生化分析室

用途：在以培养细胞产物为主要目的的实验室中，应建立相应的分析化验实验室，以便于对培养物的有效成分随时进行取样检查。大型的次生产物生产实验室，还应建立有效物质分离实验室。

注意事项

细胞工程实验室布局便于隔离、便于操作、便于灭菌、便于观察，可根据细胞工程实验的操作程序安排。接种室、培养室应放在与外界环境的隔离的区域，灭菌室应与接种室相邻等等。

 

洗涤室设备	配置室设备

 

细胞工程实验室常规设备

实验室主要仪器设备包括常规设备、灭菌设备、培养设备等。熟练掌握它们的结构、用途、使用方法及注意事项是顺利完成实验的重要保证。

主要是用于试剂保存与称量、培养基配制与分装和水处理等。如天平、冰箱和冰柜、酸度计、离心机、水纯化装置等。

1、天平

主要用途：试剂、样品和标准品的称量；

性能要求：不同精度的天平（0.001或0.0001，0.01或0.1）；

配置数量：2～3台

2、冰箱

主要用途：用于各种维生素和激素类药品及培养基母液的保存或某些实验材料的低温处理；

性能要求：低温冰箱，有时需用到超低温冰箱（-80℃）

配置数量：1～2台

低温保存箱	超-86/-150℃低温保存箱

 

低温保存箱	超-86/-150℃低温保存箱

3、酸度计

主要用途：用于测定培养基及其它溶液的pH；

性能要求：一般要求可测定pH范围1-14之间，精度0.01即可；

4、离心机

主要用途：用于细胞、原生质体等活细胞分离，亦用于培养细胞的细胞器、核酸以及蛋白质的分离提取；

性能要求：

>细胞、原生质体等活细胞的分离用低速离心机

>核酸、蛋白质分离用高速冷冻离心机

>规模化生产次生产物，还需选择大型离心分离系统

5、加热器

主要用途：用于培养基的配制

配置：电炉、微波炉

6、纯水装置

主要用途：离体培养应使用符合试验要求的纯水或蒸馏水；

配置：蒸馏水器、纯水机

7、分装设备

主要用途：用于大型生产实验室培养基的分装。
 

细胞工程实验室灭菌设备

实验室主要仪器设备包括常规设备、灭菌设备、培养设备等。熟练掌握它们的结构、用途、使用方法及注意事项是顺利完成实验的重要保证。

1、高压蒸汽消毒装置

培养基、蒸馏水、不含糖的缓冲液、培养器皿及其他用具等均需经过高压蒸汽消毒灭菌后方可使用。高压灭菌器时，一般在120℃ ，控温15 ~ 40分钟既可切断电源,缓慢降压至读数为0时，方可取出灭菌物。

高压灭菌器：手提式、立式、卧式

2、干燥灭菌器

用于各种用具的灭菌。通常采用160 ~ 180°C持续90分钟来灭菌。
 

干热灭菌器	上海一恒鼓风干燥箱（烘箱）

 

细胞工程实验室培养设备

1、培养设备包括培养架、培养箱、摇床和生物反应器等。

 

上海旻泉光照培养箱	人工气候箱

 

摇床（振荡器）	生物反应器

2、倒置显微镜

多用于隔瓶观察、记录外植体及悬浮培养物（细胞团、原生质体等）的生长情况。

3、双筒实体显微镜

多用于剥离植物茎尖。

4、细胞计数工具

用作培养细胞的计数和活性的观察。

5、细胞冷冻保存装置

普通的液氮容器常称为液氮罐。液氮温度约为-196°C ,使用时要注意勿使液氮溅到皮肤上，以防冻伤。由于液氮不断挥发，应注意观察存留液氮情况,及时补充液氮，避免挥发过多而导致细胞受损。

6、其他仪器如磁力搅拌器、恒温水浴箱、振荡器、超声波清洗仪等。
 

加热型磁力搅拌器	恒温水浴锅

 

加热型磁力搅拌器	超声波清洗仪

 

细胞工程实验室培养容器与用具

1、接种用具

用途：主要用于接种外植体、解剖动物、取材和原代培养中切割组织。

消毒方法采用高压蒸汽消毒或采用70%酒精浸泡消毒。

2、培养器皿

指盛有培养基并提供培养物生长的无菌器皿。

玻璃容器：一般用无色并不产生颜色折射的硼硅酸盐玻璃材质( 包括各种规格的培养皿、三角瓶、试管、培养瓶）

塑料容器：材质轻、不易破碎、制作方便，使用广泛(一次性的和可重复使用的）

3、移液器

手动、电动移液器（根据需求选用微量或多排型号）

 

艾本德Eppendorf Research® plus 手动移液器	艾本德Eppendorf Xplorer® plus电动移液器

（五）无菌操作设备

超净(净化)工作台是目前已普遍应用的无菌操作装置。

超净工作台的工作原理是利用鼓风机驱动空气遁过高效滤器除去空气中的尘埃颗粒，使空气得到净化。净化空气徐徐通过工作台面，使工作台内构成无菌环境。

如果细胞工程实验室设有生化分析室，则还需要配备相应的生化分析仪器设备，如酶标仪、高效液相色谱仪等。

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