微生物实验室培养

微生物实验室一般实验室工程和净化工程不同。一般由主体实验室和辅助功能实验室组成，设计方案也与其他实验室大不相同。

微生物安全实验室必须保证人身安全、环境安全、废弃物安全和样品安全，可以长期安全运行，同时为实验室工作人员提供舒适、良好的工作环境。

微生物实验室概况

食品微生物实验室主要负责各种微生物项目的检查，主要检查项目有菌落总数、大肠菌群、霉菌、酵母、乳酸菌、双歧杆菌、罐头商业无菌、致病菌(沙门氏菌、志贺氏菌、溶血性链球、金黄色葡萄球菌等)。

微生物实验室由准备室、洗涤室、灭菌室、无菌室、恒温培养室和普通实验室六部分组成。这些房间的共同特点是地板和墙壁质地光滑硬，仪器和设备陈设简洁，易于清洁。

三级生物安全防护实验室可以与其他用途的房屋设置在建筑物中，但必须设置区域。该区通过隔离门与公共走廊或公共部分相隔。

1.三级生物安全防护实验室的核心区域包括实验间和相连的缓冲间，缓冲间形成进入实验间的通道。必须设置两个连锁门，其中一个门打开时，另一个门自动关闭。使用电动连锁装置时，断电时必须打开两扇门。在缓冲间可以进行二次更衣的实验室通风系统不设置自动控制装置时，缓冲间面积不得过大，不得超过实验间面积的八分之一的ii级或iii级生物安全柜的设置远离实验间入口，避免员工频繁移动的区域，有助于形成气流从清洁区域流向污染区域的气流型。

备用室用于调配培养基和样品处理等。室内设有试剂柜、储存器具或材料的柜台、实验台、电炉、冰箱和上下水道、电源等。

洗涤室用于洗涤器具等。因为使用过的容器被微生物污染，所以有时也有病原微生物。因此，在条件允许的情况下，最好安装洗衣间。室内需要加热器、蒸锅、洗盘用的盆、桶等，还需要各种瓶刷、去污粉、肥皂、洗衣粉等。

灭菌室主要用于培育基础的灭菌和各种器具的灭菌，室内需要高压蒸汽灭菌器、烤箱等灭菌设备和设施。

无菌室又称接种室，是系统接种、纯化菌种等无菌操作的专用实验室。微生物工作中，菌种接种移植是主要操作，该操作的特点是保证菌种纯种，防止杂菌污染。在一般环境的空气中，由于灰尘和杂菌很多，容易造成污染，对接种子的工作受到很大的干扰。

1.无菌室安装

无菌室应按经济科学原则安装。其基本要求如下:

(1)无菌室应有内外两个，内外无菌室，外外外缓冲室。房间容积不要太大，以便空气灭菌。最小内间面积2×2.5=5m2，外间面积1×2=2m2，高度最好在2.5m以下，需要天花板。

(2)内部应设置拉门，以减少空气波动，门应设置在离工作台最远的位置。外部门最好也使用拉门，设置在距离内部最远的位置。

(3)在分隔内外的墙壁和隔扇上，打开小窗户，制作接种过程中必要的内外传递物品的通道，减少人进出内外的次数，降低污染程度。小窗宽60cm，高40cm，厚30cm，内外挂对拉的窗扇。

(4)无菌室容积小而严密，使用一段时间后，室内温度高，应设置通风窗。通气窗应设置在室内入口的天花板上(即离工作台最远的位置)，最好是双层结构，外层为百叶窗，内层可以使用板式窗。通风窗在室内使用后，在灭菌前打开，可以流通空气。有条件可以安装恒温恒湿机。

2.无菌室内设备和工具

(1)无菌室内桌面，无论是什么材质、用途，都要求表面光滑和桌面水平。

(2)在内室和外室各设置紫外线灯(多为30W)。内室的紫外线灯应安装在经常工作的座位正上方，离地面2m，外室的紫外线灯可安装在外室的中央。

(3)外室需要专用的工作服、鞋子、帽子、口罩、盛苏儿水的瓷盆和毛巾、喷雾器和5%的煤酸溶液等。

(4)室内需要酒精灯、常用接种工具、不锈钢刀、剪刀、镊子、70%酒精棉球、工业酒精、玻璃片、特殊蜡笔、记录本、铅笔、标签纸、胶水、废弃物篮等。

3.无菌室灭菌消毒

(1)薰衣草:这是无菌室彻底灭菌的措施。无菌室长期使用，污染严重时，应进行熏蒸灭菌。可用甲醛、乳酸或硫磺熏蒸。

(2)喷雾:每次使用无菌室前进行。喷雾可以促进空气中的微粒子和微生物沉降，防止桌面和地面的微尘飞场，具有杀菌作用。可以用5%的煤酸喷雾。

(3)紫外线照射:每次使用无菌室前进行。紫外线具有良好的杀菌效果。通常打开紫外线灯照射30~60min。

4.无菌室工作规程

(1)无菌室灭菌。每次使用前打开紫外线灯照射30min以上，或者使用前30min，向内外室喷射5%的煤酸。

(2)用肥皂洗手后，将必要的设备移动到外室，在外室更换灭菌的工作服、帽子和鞋子，戴上口罩，用2%的煤酚肥皂液洗手2分钟。

(3)将各种需要的物品转移到室内清点、位置，用5%的煤酸在桌子上和操作员的站点空间喷雾，返回室外，5~10分钟后进入室内工作。

(4)接种操作前，用70%的酒精棉球擦手无菌操作时，动作缓慢，尽量减少空气变动和地面灰尘。

(5)工作中应注意安全。如果棉塞着火，用手握住或用湿布包起来熄灭，不要用嘴吹，以免燃烧扩大；如果有菌培养物洒落或打碎有菌容器，用浸润5%的碳酸抹布包起来，用浸润5%的碳酸抹布擦拭桌面或地面，用酒精棉球擦拭手后继续操作。

(6)工作结束后，立即收拾桌面，将无菌室保管的物品和废弃物全部取出无菌室后，在无菌室喷雾5%的煤酸，或者打开紫外线灯照射30min。

1.培养室的设置

(1)培养室应有内外两个，内外两个，内外两个是缓冲室。房间容积不应大，有利于空气灭菌，室内面积应在3.2×4.4=14m2左右，室外面积应在3.2×1.8=6m2左右，高度应在2.5m左右。

(2)分隔室内和室外墙壁的上部应设置空气过滤装置的通风口。

(3)为了满足微生物对温度的需要，必须设置恒温恒湿机。

(4)内外室在室中央设置紫外线灯，用于灭菌。

2.培养室内设备和工具

(1)室内通常配备培养架和摇动机(摇动床)。常用的摇瓶机有旋转式、往复式两种。(2)外室应有专用工作服、鞋子、帽子、口罩、手持喷雾器和5%煤酸溶液、70%酒精棉球等。

3.培养室灭菌、消毒

同无菌室灭菌、消毒措施。

小规模培养不启用恒温培养室，在恒温培养箱中进行。

微生物实验室设计方案！

微生物观察、计数和生理生化测量的场所。室内陈设因工作侧重点不同而有很大差异。一般配备实验台、显微镜、橱柜和工具。实验台要求平整光滑，实验箱要充分容纳日常使用的工具和药品等。

是进入无菌室前工作人员更衣、洗手的地方。在室内设置无菌室和缓冲室的电源控制开关，放置无菌操作时穿的工作服、鞋子、帽子、口罩等。

注册待检样本；出具检验报告；办理相关文件；放松休息等

1.必须安装独立的通风空调系统来控制实验室的气流方向和压力。该系统必须确保实验室的使用，室内空气除了通过排气管道高效过滤排出外，不得从实验室的其他部位和间隙排出到室外，同时确保实验室内的气流从清洁区域流向污染区域。进风口和排风口的布局应使实验区内的死亡空间最小化。

2.通风空调系统为直排系统，不得采用部分回风系统。

3.环境参数:与实验室外部相比，实验室内部保持负压。实验室的相对压力最好是-30Pa~-40Pa，缓冲室的相对压力最好是-15Pa~-20Pa。实验室内的温湿度最好控制在人体的舒适范围内，或者根据工艺要求来决定。实验室内空气清洁度最好是GB50073-2001《清洁现场设计规范》中定义的7级到8级。实验室人工照明均匀，不耀眼，照度在500lx以上。

4.为确保实验室内的气流从清洁区域流向污染区域，实验室内不得使用双侧均匀分布的排气口布局。不宜采用上送上排的通风设计。生物安全柜排出的经内部高效过滤的空气以通过系统的排气管直接排出到大气中，也可以送入建筑物的排气系统。应确保生物安全柜与排风系统的压力平衡。

5.实验室进风应经初、中、高效三级过滤。

6.实验室排风必须经过高效过滤或其他方法处理后，以不低于12m/s的速度直接排到空中。该排气口应远离系统进气口的位置。处理后的排风也可排入建筑物的排风管道，但不得返回该建筑物的任何部位。

7.进风和排风高效过滤器必须安装在实验室设置在围护结构的风口上，以免污染管道。

8.在实验室的通风系统中，应在进气和排气总管处安装气密型调节阀，必要时可完全关闭室内化学熏蒸消毒。

9.实验室通风系统所使用的所有部件都必须是气密型。使用的高效过滤器不得为木框架。

10.必须设置鼓风机启动自动连锁装置，确保实验室启动时打开排气扇后打开鼓风机。关闭时关闭鼓风机后关闭排气扇