PCR实验室是一个非常不寻常但非常重要的实验室类型。主要作用是通过高纳米的分子生物技术对病毒进行检测,并对药物的抗毒性和疗效进行实验。那么PCR实验室是什么样子的呢?
PCR实验室区域设计
(1)合理设置各实验区域;
(2)每个实验区域应有明显的标记(如醒目的门板或不同的地面颜色等),避免不同实验区域的设备物品、试剂等混淆。
2、系统设置合理
(1)空调通风系统设置合理,尽量采用全送全排空调系统;
(2)严格控制气流压力,确保不同实验区域的不同压力要求。
1、物流:在试剂准备区与标本制备区、标本制备区与PCR扩增区之间,以及扩增区域和纯化区之间设计有电子连锁不锈钢传递窗,以单向进行试剂、标本等物品传送,配制的试剂通过单向传递窗由试剂准备区传递到标本制备区,处理过的标本通过单向传递窗由标本制备区传递到PCR扩增区,按照工艺流程逐次传递,避免返流。单向物品传送系统既保障了标本试剂不受污染,又保障了标本试剂不污染环境。
2、人流:人员通过闸间分别进入各自实验区域,进出各实验区域需要在闸间区域更换洁净工作服,手消毒等。
PCR实验室设计分为四个区域,进⼊各⼯作区域必须严格按照单⼀⽅向进⾏,不同的⼯作区域使⽤不同的⼯作服(例如不同的颜
⾊)。⼯作⼈员离开各⼯作区域时,不得将⼯作服带出,四区域分别为:
1.试剂配制区
2.样品处理区
3.核酸扩增区
4.产物分析区如使⽤全⾃动分析仪,
区域可适当合并,三四区可合并为扩增产物分析。
各区的功能:完备的实验室配套设施是保证实验⼯作的必要条件,应根据各个实验室实验内容的不同配备相应的设备和仪器,如超净⼯作台、离⼼机、加样器等。
PCR实验室并没有严格的净化要求,但是为避免各个实验区域间交叉污染的可能性,宜采⽤全送全排的⽓流组织形式。同时,要严格控制送、排风的⽐例以保证各实验区的压⼒要求。
1、试剂贮存和准备区 该实验区主要进⾏的操作为贮存试剂的制备、试剂的分装和主反应混合液的制备。试剂和⽤于标本制作的材料应直接运送⾄该区,不得经过其他区域。试剂原材料必须贮存在本区内,并在本区内制备成所需的贮存试剂。 对与⽓流压⼒的控制,本区并没有严格的要求。
2、标本制备区 该区域主要进⾏的操作为临床标本的保存、核酸(RNA、DNA)提取、贮存及其加⼊⾄扩增反应管和测定RNA时 DNA的合成。本区的压⼒梯度要求为:相对于邻近区域为正压,以避免从邻近区进⼊本区的⽓溶胶污染。另外,由于在加样操作中可能会发⽣⽓溶胶所致的污染,所以应避免在本区内不必要的⾛动。
扩增反应混合物配制和扩增区 该区域主要进⾏的操作为DNA或DNA扩增。ft外,已制备的DNA模板和合成的DNA(来⾃样本制备区)的加⼊和主反应混合液(来⾃试剂贮存和制备区)制备成反应混合液等也可在本区内进⾏。在巢式PCR测定中,通 常在第⼀轮扩增后必须打开反应管,因ft巢式扩增有较⾼的污染危险性,第⼆次加样必须在本区内进⾏。 本区的压⼒梯度要 求为:相对于邻近区域为负压,以避免⽓溶胶从本区漏出。为避免⽓溶胶所致的污染,应尽量减少在本区内的不必要的⾛动。个别操作如加样等应在超净台内进⾏。
4、扩增产物分析区该区域主要进⾏的操作为扩增⽚段的测定。如使⽤全⾃动封闭分析仪器检测,ft区域可不设。本区是最主要的扩增产物污染来源,因ft对本区的压⼒梯度的要求为:相对于邻近区域为负压,以避免扩增产物从本区扩散⾄其它区域。
以上就是诚志对有关“PCR实验室有哪些分区?PCR实验室分区的功能是什么?”相关问题的说明,希望能够帮助到你,更多实验室知识敬请关注我们。